Сравнительный анализ требований Европейской и Российской фармакопеи для стандартизирования сырья растений семейства губоцветные

1 видно, что во всех НД число аптечных видов ЛР больше, чем видов ЛРС, то есть один вид ЛРС заготавливают от нескольких производящих растений. Практически половина из ЛР в ГР РФ 2008 г., – 177 видов – не встречается Европейской фармакопеи. В то же время, видовое разнообразие ЛР, используемых исторически на территории нашей страны в народной медицине (более 10 тысяч видов), превышает их количество для любых европейских стран. Это объяснимо большой площадью России, разнообразием ее климатических поясов и национальных культурно-медицинских традиций населения.Таким образом, нами были выявлены различия в формировании номенклатуры ЛР в НД различных стран европейской зоны и РФ, на которую повлияли географическое положение каждой страны, методы традиционной медицины, наличие или отсутствие государственной поддержки метода фитотерапии на их территории, уровень развития науки в стране. Заметная неоднородность номенклатуры ЛР (только 37,0% от общего числа растений в Европейской фармакопее и ГР РФ 2008 г.) в основном объясняется присутствием в выборке, ориентированных преимущественно на местные сырьевые ресурсы. В итоге мы выявили широкий перечень хорошо изученных ЛР (более сотни видов), фармакопейных за рубежом, но неофицинальных в РФ и перспективных с точки зрения возможности расширения номенклатуры отечественных растительных ЛС.3. Сравнение стандартизации Губоцветных в ГФ РФ и Европейской Фармакопее3.1. Сравнение показателей регламентации сырья в ЕФ и ГФ РФТребование Всемирной организации здравоохранения в отношении формирования современной стратегии в области лекарственных средств призывает к разработке и внедрению унифицированных стандартов качества на лекарственные средства.Постоянное пополнение фармацевтического рынка РФ за счет отечественного и импортного лекарственного растительного сырья и лекарственных средств на их основе, непрерывный рост требований к их качеству обусловливает необходимость постоянного совершенствования системы государственной стандартизации.Стандартизация лекарственного растительного сырья и препаратов растительного происхождения является гарантией их качества и обеспечивает эффективность и безопасность при применении.В современных условиях обеспечение качества лекарственного растительного сырья может быть достигнуто за счет повышения уровня его стандартизации и приведения нормативной базы в соответствие с требованиями Европейской фармакопеи.Губоцветные встречается практически по всей РФ, за исключением южных степных районов.Растет на целинных степных и остепенённых склонах балок и речных долин, различных обнажениях, в зарослях степных кустарников, на сухих лесных опушках и полянах, иногда в изреженных сухих лесах.Запасы сырья большие (ежегодно можно заготавливать несколько тонн сырья), однако в связи с интенсивным выпасом скота на склонах и опустошением зарослей они постепенно уменьшаются.Основные заготовки проводятся в Лесостепи и северной части Степи.Губоцветные содержат эфирное масло (0,2%), кислоты (салициловая, аскорбиновая), ванилин, воск, фенологликозиды (спиреин и монотропитин), дубильные вещества (3-19%) и флавоноиды (4-9,7%), являются растительным источником железа, меди и кобальта.Цветки содержат эфирное масло, гликозиды, флавоноиды, витамин С (количество соответствует содержанию витамина в смородине черной).Корни - фенологликозиды (спиреин, монотропин), много крахмала, кислоты (салициловая, аскорбиновая), дубильные вещества (3,5-21,8%), воск.Среди основных действующих веществ Губоцветных следует выделить флавоноиды, представленные флавонолами, флавонами, флавононы и производными халконивгиперозид и спиреозид, гликозид кемпферол и авикулярин)салицилаты - салициловый альдегид (содержание составляет до 70%), изосалицин, метилсалицилат, салицин, салициловую кислотуэфирное масло, основными компонентами которого являются салицилаты, бензиловый спирт, бензальдегид, етилбензоат, гелиотропин, фенилацетат, ванилин;танины.Таблица 2. Сравнение регламентированного сырья Губоцветных в разных ФармакопеяхГФ РФЕвропейская ФармакопеяМелисса лекарственная - Melissa officinalisМелисса лекарственная - Melissa officinalisМята перечная - Mentha piperita L.Мята перечная - Mentha piperita L.Шалфей лекарственный - Salvia officinalis L.Шалфей лекарственный - Salvia officinalis L.Розмарин лекарственный - Rosmarinus officinalis L.Розмарин лекарственный - Rosmarinus officinalis L.Тимьян ползучий (чабрец) - Thymus serpyllum L.Душица обыкновенная - Origanum vulgare LДушица обыкновенная - Origanum vulgare LКачество сырья Губоцветных регламентирована монографиями как Европейской фармакопеи (ЕФ), так и ГФ РФ.Широкое применение данного вида лекарственного растительного сырья в народной и официальней медицине обуславливает, наличие на фармацевтическом рынке РФ фитотерапевтических препаратов, содержащих Губоцветные, а также перспективность разработки отечественных препаратов с широким спектром фармакологического действия на основе мяты, Мелиссы и т.п. обосновывают необходимость введения в действие нормативной документации на это сырье.3.2. ИдентификацияМакроскопия.Микроскопия.При проведении макроскопических и микроскопических исследований было установлено, что исследуемые образцы сырья по внешним и анатомическим признакам соответствуют требованиям монографии ЕФ и РФ ГФ (табл. 3).Таблица 3.Регламентные показатели анализаПоказатель ЕФГФ РФМакроскопия ЕФ ГФ РФМикроскопия ЕФ ГФ РФПотеря в массе при высушивании не более 12% не более 17%Зола общая не более 7% не более 5%Посторонние примеси не более 2% не более 3%Стеблей диаметром более 5 мм не более 5% не более 5%Содержание эфирного маслане менее 1 мл / кг не менее 1 мл / кгИдентификация.Тонкослойной хроматографииПо требованиям монографии ЕФ, идентификацию проводят методом тонкослойной хроматографии с использованием пластинок со слоем силикагеля Р в системе растворителей гексан Р - толуол Р (50:50).В качестве испытуемого раствора использовали раствор эфирного масла в ксилоле (объем пробы, наносился: 10 мкл, полосами), полученный при проведении количественного определения.В качестве растворов сравнения - 0,1 мл метилсалицилат Р и 0,1 мл салицилового альдегида Р в ксилоле Р. Расстояние, которое проходила подвижная фаза составляла 10 см от линии старта.Полученные хроматограммы высушивали на воздухе, после чего пластинки опрыскивали 3 мл раствора железа хлорида Р3 и обращались в дневном свете.Верхняя часть пластинкиметилсалицилат: фиолетовый-коричневая зонасалициловый альдегид: фиолетово-коричневая зонафиолетово-коричневая зона (метилсалицилат)фиолетово-коричневаязона(салициловый альдегид)Раствор сравнения Испытуемый растворРис.1. Схемы хроматограмм испытуемогораствора и раствора сравнения.При проведении идентификации методом тонкослойной хроматографии было установлено, что в исследуемых образцах сырья оказываются соответствующие зоны регламентируемых монографией ЕФ.ГФ XI, вып. 1, с. 290-294, определяет содержание эфирных масел путем его перегонки (гидродистилляции) с водяным паром из растительного сырья. Содержание масла выражают в объемно-весовых процентах в пересчете на абсолютно сухое сырье.Метод количественного определения содержания эфирного масла в растительном сырье основан:1) на физических свойствах эфирного масла - летучести и практической нерастворимости в воде;2) на отсутствии химического взаимодействия эфирного масла и воды;3) на законе Дальтона о парциальных давлениях. Согласно закону, смесь жидкостей закипает тогда, когда сумма их парциальных давлений достигает атмосферного давления. Следовательно, давление паров смеси жидкостей (вода + эфирное масло) достигнет атмосферного давления еще до кипения воды. Перегонка с парами воды при нормальном давлении (760 мм рт.ст.) протекает всегда при температуре ниже 100 °С, что позволяет избежать деструкции компонентов эфирного масла.Например, смесь скипидара и воды будет перегоняться при атмосферном давлении при температуре 95 °С (вместо 160 °С для пинена - основного компонента скипидара и 100 °С для воды).Прибор для количественного определения эфирных масел (прибор Клевенджера) состоит из экстракционной колбы, соединенной с обратным холодильником и приемника, в основе которого V-образная трубка. Приемник работает по принципу сообщающихся сосудов: эфирное масло собирается на поверхности воды, избыток воды по узкому и более низкому колену возвращается обратно в колбу.Рис.2. прибор КлевенджераДалее, согласно ГФ XI, (раздел «Общие методы анализа»), определение проводят одним из 4 методов в зависимости от количества в сырье эфирного масла, его состава, плотности и термолабильности.3.3. Количественное определениеЕФ регламентирует содержание эфирного масла в сырье.Определение проводят методом перегонки с водяным паром со скоростью от 2 мл / мин до 3 мл / мин в течение 2 ч с 0,5 мл ксилола Р в градуированной трубке.Допустимое содержание эфирного масла в сырье составляет не менее 1 мл / кг, в пересчете на сухое сырье.Таблица 4. Количественные определения эфирных масел в Русской и Европейской ФармакопеяхГФ XIЕвропейская ФармакопеяМетод 2 (метод Клевенджера) используют, когда сырье содержит эфирного масла менее 0,2-0,3 %. Этот метод дает меньшую ошибку опыта. Приемник вынесен за пределы экстракционной колбы, что позволяет определить в сырье содержание термолабильного эфирного масла. Этим методом определяют содержание эфирного масла в сырье ромашки, тмина, мяты, шалфея, эвкалипта.Метод 1 (метод Гинзберга) применяют для сырья, где много эфирного масла, масло термостабильное, в его составе преобладают моно- и бициклические монотерпеноиды. Приемник для сбора эфирного масла помещается в экстракционной колбе. Этим методом определяют содержание эфирного масла в сырье можжевельника, мяты, шалфея, эвкалипта, тмина.прибор ГинзбергаМетод 4 впервые включен в ГФ XI и отличается от метода 3 возможностью контролировать температуру конденсации. Во время гидродистилляции температура в отстойнике не должна превышать 25 °С.Этапы количественного определения:подготовительный: измельчают сырье в третьей аналитической пробе до размера частиц, указанного в нормативной документации, берут две точные навески сырья, отмеряют воду очищенную, собирают прибор;гидродистилляция: эфирномасличное сырье с водой нагревают в колбе на колбонагревателе, конденсат эфирного масла собирают в приемнике;расчет результатов: замеряют объем эфирного масла, рассчитывают процентное содержание масла в сырье, сравнивают полученный показатель с нормативным документом.Метод 3 (метод Клевенджера). Используется прибор Клевенджера. В приемник добавляют органический растворитель для разрушения эмульсии или растворения загустевшего или тяжелого масла. Этим методом определяют эфирное масло в сырье аниса, аира и тысячелистника.3.4. Посторонние примесиВ монографии контролируется содержание стеблей диаметром, более 5 мм (не более 5%) и содержание посторонних примесей (не более 2%).При исследовании образцов установлено их соответствие данным нормированием (табл. 3).В ЕФ приводятся показатели «Потеря в массе при высушивании», что составляет не более 12%;«Зола общая» - не более 7%.Исследуемые образцы сырья с данными требованиям (табл.3).Примесь спирта, жирного масла и воды определяют специальными пробами. Примесь терпентинного масла, воска, продуктов окисления и др. можно определить только по изменению органолептических и числовых показателей.Специальные пробы:Спирт (этанол):Таблица 5. Способы определения спиртов в Русской и Европейской ФармакопеяхГФ РФЕвропейская Фармакопея2-3 капли эфирного масла наносят на воду на часовом стекле. Наблюдают на черном фоне. Не должно быть заметного помутнения вокруг капель масла.1мл масла в пробирке нагревают до кипения. Пробирка должна быть закрыта ватой с кристаллом фуксина. Пары спирта растворяют фуксин. Не должно быть фиолетово-розового окрашивания ваты.Жирные и минеральные масла: 1 мл эфирного масла взбалтывают в пробирке с 10 мл спирта; не должно быть помутнения и капель жирного масла.Вода: определяют методом дистилляции.Примесь восков, вазелина, жирных масел, высокомолекулярных терпенов, спирта снижает показатель преломления, угол вращения плоскости поляризации, плотность эфирного масла. При растворении в спирте (этаноле) углеводороды всплывут наверх, а жирное масло каплями опустится на дно.Продукты окисления компонентов эфирного масла изменяют органолептические показатели, улучшают растворимость в спирте 70-96 %, увеличивают показатель плотности, показатель преломления, увеличивают кислотное число и уменьшают эфирное число и эфирное число после ацетилирования.Если анализ эфирного масла проводят внаучных целях, то сумму компонентов эфирного масла исследуют подробно. Для этого фракции эфирных масел исследуют с помощью различных хроматографических и спектрометрических методов, в том числе используются электронная спектроскопия, ИК-спектроскопия и ЯМР-спектроскопия, особо рекомендуемы в Европейской Фармакопее.ЗаключениеВ этой работе приведена общая и сравнительная характеристика семейства Губоцветные, которое является одним из обширных семейств. Оно включает 200 родов и 3500 видов, различных жизненных форм. Представители семейства легко узнаются в природе по характерному двугубому венчику, супротивным листьям и 4-гранным стеблям. Часто неодревесневшие части растения покрыты волосками и головчатыми железками, содержащими ароматические эфирные масла.Они содержат такие биологически активные вещества, как алкалоиды, гликозиды, кумарины и фурокумарины, эфирные масла, витамины, дубильные вещества и др. Лекарственные растения семейства Губоцветные обладают противовоспалительным, противопростудным, болеутоляющим, желчегонным свойствами, применяются для улучшения деятельности сердечно-сосудистой системы, действуютуспокаивающе.В данной курсовой работе выполнено:1. Изучена отечественная европейская фармакопея в части стандартизации ЛРС в сравнительном аспекте. Показано, что основные показатели, используемые при стандартизации ЛРС, в том числе характеристики его подлинности и показатели качества в РФмаксимально приближены к европейскому уровню. 2. Изучена номенклатура аптечных ЛРС и производящих растений в отечественной ГФ. Установлено, что в ГФ в настоящее время (2008 г.) аптечные351 вид ЛР и 309 видов ЛРС.3. Изучена номенклатура производящих растений и ЛРС в Европейской фармакопее. Выявлены тенденции ее формирования. 4. Проведен сравнительный анализ номенклатуры отечественных и европейских аптечных видов ЛР семейства Губоцветных. Установлено, что по числу фармакопейных растений в изученных НД Россия занимает 4-е место. Выявлено более тысячи видов ЛР, хорошо изученных, но неофицинальных в РФ.Списокиспользуемыхисточников:Артюховский А.К., Козлов А.Т. Лекарственные растения: Учеб.пособие. - Воронеж: Воронеж. гос. лесотехн. акад. , 1999. 175с.Атлас лекарственных растений России.- М .: Всерос.научно исслед.ин-т лек.и аромат.раст., 2006. - С. 159-162.Берсон, Г.З. Дикорастущие съедобные растения / Г.З. Берсон. – Л.: Гидрометиздат, 1991. – 69 с.Биохимические методы анализа растений / под ред. М.Н. Запрометова. – М.: Иностранная литература, 1960. – 625 с.Владимиров А.Ю., гарная С.В.Актуальность и перспективы разработки активных субстанций на основе Fillipendula ulmaria (L.) Maxim.// Материалы 65-й региональной конференции по фармации и фармакологии (18-22 января 2010 г.).- Пятигорская государственная фармацевтическая академия, 2010. - С. 22-23.Владимиров А.Ю., Серая Л.М., Хорошая С.В.Стандартизация травы лабазника вязолистного (Filipendula ulmaria (L.) Maxim.) По микроскопическим признакам / Фитотерапия.Журнал.- 2010. - № 4. - С. 75-78.Вульф, Е.В. Мировые ресурсы полезных растений / Е.В. Вульф, О.Ф. Малеева. – Л.: Наука, 1965.Гаммерман А.Ф., Кадаев Г.Н., Яценко-Хмелевский А.А. Лекарственные растения (растения-целители): Справ. пособие. - М.: Высшая школа, 1983. - 400 с.Гаммерман, А.Ф. Курс фармакогнозии / А.Ф. Гаммерман. – М., Л.: Медицина, 1967. – 612 с.Георгиевский, В.Б. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.Б. Георгиевский, Н.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук. – Новосибирск: Наука, 1990. – 328 с.Государственная фармакопея СССР, 11-е изд. Вып. 2. – М.: Медицина, 1990. – 400 с.Государственная фармакопея СССР. 11-е изд. Вып. 1. – М.: Медицина,1987. – 336 с.Государственная Фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. - 11-е изд. – М. : Медицина, 1990. – 398 с.Государственный реестр лекарственных средств. Т. 1. Официальное издание. – М., 2010. –1227 с.Гринкевич Н.И. Лекарственные растения: Справочное пособие.  М.: Высшая кола, 1991.Долгова, А.А. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии / Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. – М.: Медицина, 1977. – 256 с.Ермакова, А.И. Методы биохимического исследования растений / А.И. Ермакова. –Л., 1972. – 364 с.Жизнь растений / Гл. ред.А.Л. Тахтаджян -том 5 (2) - М.: "Просвещение", 1981. - 476 с.Жоголев Д.Т., Галин Л.Л., Добросердова И.И. и др. Дикорастущие растения и грибы в медицине и кулинарии. - М.: Воениздат, 1994. - 448 с.Задорожный А.М., Кошкин А.Г., Соколов С.Я. и др. Справочник по лекарственным растениям. - М.: Лесная промышленность, 1988. - 415 с.Замятина Н. Лекарственные растения / Н. Замятина. – М. : ABF, 1998. – 493 с.Котов А.Исследования по разработке и введению монографий на лекарственное растительное сырье в ГФ РФ // Фармаком.- 2009. - № 1. - С. 5-19.Куркин В.А. Фармакогнозия.  Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ», 2004. – 1180 с.Ладыгина Е.Я., Сафронич Л.Н., Отряшенкова В.Э. и др. Химический анализ лекарственных растений: учебное пособие для фармацевтических вузов. - М.: Высшая школа, 1983. - 176 с.Лекарственное растительное сырье. Государственные стандарты Союза ССР. – М.: Изд-во стандартов, 1980. – 196 с.Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия : учеб. пособие /под ред. Г.П. Яковлева, К.Ф. Блиновой. – СПб. : СпецЛит, 2004. – 765 с.Лекарственное сырье растительного и животного происхождения. Фармакогнозия: учебное пособие / под ред. Г. П. Яковлева. – СПб.: СпецЛит 2006. – 845 с.: ил.Лекарственные растения государственной фармакопеи / Под ред. И.А. Самылиной, В.А. Северцева. – М.: "АНМИ", 2003. – 534 с.Лекарственные растения Государственной Фармакопеи. / Под. ред. И.А. Самылиной, В.А. Северцева.  М.: «АНМИ», 1999. Лекарственные растения и лекарственное растительное сырье, содержащие витамины, полисахариды, жирные масла: учебно-методическое пособие / И.М. Коренская, Н.П. Ивановская, О.А.Колосова. – Издательско-полиграфический центр ВГУ, 2008. – 88 с.Маевский П.Ф. Флора средней полосы европейской части России. - М.: Товарищество научных изданий КМК, 2006. - 600 с.Мазнев Н.И. Лекарственные растения. Справочник. - М.: "Мартин", 1999. - 479с.Махлаюк, В.Б. Лекарственные растения в народной медицине / В.Б. Махлаюк. – Саратов: Приволжское книжное издательство, 1993. – 543 с.Машковский, М. Д. Лекарственные средства.— 16-е изд., перераб., испр. и доп.— М.: Умеренков, 2010.— с 187.Методика количественного определения суммарного содержания полифруктанов в корнях одуванчика лекарственного / Л.M. Танхаева, Д.Н. Оленников //Химия растительного сырья. – 2010. – № 2. – С. 85-89.Методы получения эфирных масел. – http://www.kvartacosmetic.ru.Муравьева, Д.А. Фармакогнозия: Учебник. – 4-е изд., перераб. и доп. / Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. – М.: Медицина, 2002. – 656 с.Носаль, М.А. Лекарственные растения и способы их применения в народе / М.А. Носаль, И.М. Носаль. – Л.: Научный центр проблем диалога, 1991. – 238 с.Носов А.М. Лекарственные растения / А.М. Носов. – М. : ЭКСМО – Пресс, 2001. – 348 с.Растительные ресурсы России и сопредельных государств. Часть I. Семейства Lycopodiaceae – Ephedraceae. Часть II. Дополнения к 1-7-му томам. – СПб.: Мир и семья-95, 1996. – 571 с.Романс Э.Я., Борисова Н.А. О возможности заготовок лекарственного растительного сырья в зонах влияния автотранспорта // Фармация. – 1988.  №4.Сало Л.П. Лекарственные растения. - М.: Медицина, 1985. - 256 с.Сергиевская Е.В. Систематика высших растений. Практический курс. - СПб.: Издательство "Лань", 1998. - 447 с.Соколов С.Я. Фитотерапия и фармакология / С.Я. Соколов. – М. :Мед. информ. агентство, 2000. – 976 с.Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям. - М.: Медицина, 1989. - 428 с.Соколов, С.Я. Справочник по лекарственным растениям / С.Я. Соколов, И.П. Замотаев. – 2-е изд. – М.: Недра, 1987. – 510 с.Спрыгин И.И. Лекарственные растения Пензенской области. - П.: Нисса-Поволжье, 1998. - 106 с.Терпило, Н.И. Анатомический атлас лекарственных растений / Н.И. Терпило. – Киев: Госмедиздат, 1961.Тихонов А.И. Биофармация. Харків: НФАУ - 2003, 238 с.Фармакогнозия : учебник. – 4-е изд., перераб. и доп. / Д.А. Муравьева, И.А. Самылина, Г.П. Яковлев. – M. : Медицина, 2007. – 656 с.: ил.Фармакогнозия: Электронное учебное пособие / Е.И. Гришина, И.С. Погодин, Е.А. Лукша – Омск: ОмГМА, 2008. – 1067 с.Флора Европейской части СССР.  М.;  СПб., Т. 1- XI, 1992-2001. Химический анализ лекарственных растений / Под ред. Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронич. – М.: Высшая школа, 1983. – 176 с.Черепанов, С.К. Сосудистые растения России и сопредельных государств / С.К. Черепанов. – СПб.: Мир и семья-95, 1995. – 989 с.Чиков, Л.С. Лекарственные растения России / Л.С. Чиков. – СПб.: Издатель, 1993. – 212 с.Шретер, Г.К. Лекарственные растения и растительное сырье, включенное в отечественные фармакопеи / Г.К. Шретер. – М.: Медицина, 1972.European Pharmacopoeia 6.0, vol. 1 / Council of Europe, Strasbourg, 2007. – 1129 p.