Влияние продуктов пчеловодства на белковый обмен

Курс ингаляций исследуемым препаратом снижал выброс первичных токсинов из патологического источника в кровь. Благодаря этому, транспортные системы крови могли справиться с поступающим объемом эндотоксинов и доставить их к местам детоксикации и выведения практически без повреждения сопутствующих структур (Анашкина и др., 2011).3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫВ качестве подопытных животных были выбраны 30 крыс (самки линии Wistar, весом 150 – 200 г). Все животные были подразделены на четыре группы: интактная группа (И-группа);контрольная группа (К-группа), которой вводили физиологический раствор в концентрации 0,1 мг/кг;опытная группа (АДР-группа), которой вводили адреналин в концентрации 0,1 мг/кг;опытная группа (АДР+АП-группа), которой вводили адреналин в концентрации 0,1 мг/кг, а затем проводили ингаляции Апингалином в течение 10 последующих дней. Все манипуляции соответствовали этическим нормами и правилам работы с лабораторными животными.Забор крови у крыс осуществляли из подъязычной вены в пробирки с антикоагулянтом (1 мл цитрата натрия). Выделение плазмы крови крыс проводили с помощью центрифугирования в течение 15 мин при скорости 3000 об/мин, сыворотки – 1500 об/мин.Определение показателей общего белка, альбумина, креатинина и мочевины в сыворотке крови проводили с помощью биохимического анализатораStat Fax 3300 (производство США) по прилагаемой производителем методике с использованием проточной кюветы.Использовались следующие расходные материалы:- UREA-B (Испания),- CREATANINE-J (Испания),- TOTALPROTEIN (Испания),- ALBUMINE (Испания).Определение фибриногена проводили на анализаторе показателей гемостаза АПГ4-01Минилаб-704 по запрограммированной методике определения концентрации фибриногена по методу Клаусса (в г/л) при оптическом режиме работы (определение по изменению коэффициента пропускания света содержимым кюветы) с использованием набора Тех-Фибриноген-тест (производитель ООО ФИРМА «ТЕХНОЛОГИЯ-СТАНДАРТ», Россия, Барнаул).Статистическую обработку данных проводили с использованием стандартных статистических методов. Проверку на нормальность распределения проводили с использованием критерия Шапиро-Уилка W. Практически все данные имели нормальное распределение. Сравнение средних арифметических проводили с помощью t-критерия Стьюдента. Различия считали статистически значимым при p <0,05. Для составления базы данных результатов исследования и проведения их статистической обработки применяли пакет программ Excel, STATISTICA 10, Past.4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯВ табл. 2 приведена статистическая характеристика результатов эксперимента, проведенная на основании расчета средней арифметической указанных значений и статистической ошибки средней арифметической для каждой группы: интактной, контроля, группы с введением адреналина, группы с введением адреналина и с последующей ингаляцией Апингалином.Таблица 2Показатели белкового обмена крови крысГруппаОбщий белок, г/лКреатинин, мкмоль/лМочевина, ммоль/лФибриноген, г/лАльбумин г/дл,И-группа84,20±4,99218,20±11,890,0130±0,00240,24±0,1043,52±1,41К-группа72,82±2,36249,72±30,780,0029±0,00082,29±0,9141,82±2,25АДР-группа71,87±4,44243,89±18,980,0054±0,000040,18±0,0543,34±0,86АДР+АП- группа72,18±1,39290,07±19,360,0073±0,00301,09±0,5744,15±1,46Статистически достоверные отличия (p< 0,05) установлены для показателей:- общего белка между И-группой и АДР+АП-группой (обращает на себя внимание снижение по сравнению с интактной группой в 1,2 раза уровня общего белка в группе крыс, которым вводился адреналин и с последующей ингаляцией Апингалина);- креатинина между И-группой и АДР+АП-группой (доказано увеличение в 1,3 раза по сравнению с интактной группой показателя креатинина в сыворотке крови крыс, которым вводился адреналин и с последующей ингаляцией Апингалина);- мочевины между И-группой и К-группой (наблюдалось снижение содержания мочевины в сыворотке крови крыс контрольной группы по сравнению с интактной группой в 4,5 раза); - мочевины между К-группой и АДР-группой (увеличивалось по сравнению с контрольной группой содержание мочевины в крови крыс опытной группы, которым вводился адреналин, в 1,9 раза); - мочевины между И-группой и АДР-группой(снизилось содержание мочевины в сыворотке крови крыс, которым вводился адреналин, по сравнению с интактом в 2,4 раза);- фибриногена между И-группой и К-группой (повысился в 9,5 раза показатель содержания фибриногена в плазме крови крыс контрольной группы после введения физиологического раствора по сравнению с таковым же у интактной группы); - фибриногена между К-группой и АДР-группой (показано, что в группе контроля показатель содержания фибриногена в плазме крови выше в 12,7 раза по сравнению с таковым же у крыс, которым вводился адреналин).Рис. 1. Динамика показателя общего белкаТаким образом, было выявлено, что показатель общего белка (см. рис. 1) снижался в 1,2 раза во всех группах по сравнению с интактом, однако статистически достоверные отличия зафиксированы только для группы с введением адреналина и последующих ингаляций Апингалином (p< 0,05).Рис. 2. Изменение концентрации креатининаРис. 3. Снижение концентрации мочевины по сравнению с интактной группойКонцентрация креатинина (см. рис. 2) была повышена во всех группах воздействия по сравнению с интактными животными, однако статистически достоверные отличия зафиксированы только для группы с введением адреналина и последующих ингаляций Апингалина (p< 0,05).Концентрация мочевины (см. рис. 3) была снижена во всех группах воздействия по сравнению с интактными, однако статистически значимую разницу удалось выявить только для группы контрольных животных и группы с введением адреналина. Кроме того, было выявлено, что в группе крыс после введения адреналина концентрация мочевины была значимо выше, чем в группе контрольных животных после введения физиологического раствора.Рис. 4. Динамика содержания фибриногенаСодержания фибриногена (см. рис. 4) в группе интактных животных и после введения адреналина практически не изменялось, но статистически значимо возрастало в группе контроля, где значимо превышало показатель группы крыс после введения адреналина.Содержание альбумина (см. рис. 5) практически не изменялось при воздействиях и соответствовало показателю в группе интактных крыс.Рис. 5. Содержание альбуминаПри сравнении групп с введением адреналина и проведением последующих ингаляций и без них, установлено, что содержание общего белка, альбумина и мочевины практически не изменялось на фоне применения продукта пчеловодства, а уровень креатинина и фибриногена повышался, но не достигал значений интактной группы, однако статистически значимой разницы выявить не удалось.Любые инъекции сопровождаются изменением содержания белков крови (кроме альбумина) по сравнению с интактом, однако статистически достоверные результаты получены только при сравнении значений мочевины после введения физиологического раствора или адреналина; креатинина и общего белка после применения Апингалина на фоне инъекции адреналина; фибриногена после введения физиологического раствора. При проведении ингаляций Апингалином статистически значимых отличий от группы моделирования отёка легких достичь не удалось, однако отмечена тенденция к увеличению фибриногена плазмы и креатинина сыворотки крови.ВЫВОДЫ1.Введение физиологического раствора вызывает изменение биохимических показателей белкового обмена крови. Выявлено статистически значимое (p<0,05) снижение мочевины и повышениефибриногена. 2. Введение адреналина вызывает угнетение белкового обмена крови, что выражается в снижении его показателей. Так, установлено достоверное (p<0,05) снижение концентрации мочевины в крови крыс. Однако, концентрация альбумина не изменяется.3. Проведение ингаляций Апингалинана фоне введения адреналина приводит к снижению показателя общего белка в 1,2 раза(p<0,05) по сравнению с интактным уровнем, хотя тенденция к такому снижению отмечена и после введения адреналина(p >0,05), и после инъекции физиологического раствора (p >0,05). Концентрация альбумина не изменялась. Увеличивалось содержание фибриногена плазмы и креатинина сыворотки крови. Для мочевины также отмечено повышение концентрации.СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ1.Анашкина А.А. Влияние апингалина на уровень эндогенной интоксикации при отеке легких у крыс / А.А.Анашкина, С.В.Копылова, С.С.Сокольский. [Электронный ресурс]. Режим доступа:http://apismf.ru/2-/763-2011-11-03-10-54-23.html2. Апингалин снижает степень эндогенной интоксикации при отеке легких у крыс / В.Н. Крылов, Е.И. Ерлыкина, С.В. Копылова, А.А. Анашкина // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. – 2015. – Вып.58. – С.88 – 91.3. Апитерапия[Электронный ресурс]. Режим доступа:  http://www.centremed.ru/index.php/apiterapiya4.Атраментова Л.А. Статистические методы в биологии / Л.А. Атраментова, О.М. Утевская. – Горловка, 2008. – 248 c.5. Ахметова Л.Т. и др. Продукты пчеловодства как биологически активные средства и альтернативные продукты питания //Л.Т. Ахметова, С.Ю. Гармонов, Ж.Ж. Сибгатуллин и др. – Вестник Казанского технологического университета. – 2011. – № 15. – С. 154 – 160.6. Блохин А.В. Теория эксперимента [Электронный ресур]: Курс лекций в двух частях: Часть 1. — Электрон. текст. дан. (1,1 Мб). — Мн.: Научно-методический центр “Электронная книга БГУ”, 2003. — Режим доступа: http://anubis.bsu.by/publications/elresources/Chemistry/blohin1.pdf . — Электрон. версия печ. публикации, 2002. — PDF формат, версия 1.4 . — Систем. требования: AdobeAcrobat 5.0 и выше.7.Блохин А.В. Теория эксперимента [Электронный ресур]: Курс лекций в двух частях: Часть 2. — Электрон. текст. дан. (1,0 Мб). — Мн.: Научно-методический центр “Электронная книга БГУ”, 2003. — Режим доступа: http://anubis.bsu.by/publications/elresources/Chemistry/blohin2.pdf . — Электрон. версия печ. публикации, 2002. — PDF формат, версия 1.4 . — Систем. требования: AdobeAcrobat 5.0 и выше.8.Данилова Л.А. Анализы крови и мочи. – 4-е изд., исправ. – СПб.: Салит-Медкнига, 2003. – 128 с.9. Дубцова Е.А. Состав, биологические свойства меда, пыльцы и маточного молочка и возможность их применения в лечебном питании // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. – 2009. – № 3. – С. 36 – 41.10.Клиническая биохимия: Учебное пособие для студентов медицинских вузов / А.Я. Цыганенко, В.И. Жуков, В.В. Мясоедов, И.В. Завгородний. – Москва: «Триада-Х», 2002. – 504 с.11.Козинец Г.И. Интерпретация анализов крови и мочи и их клиническое значение / Г.И. Козинец. – Москва: «Триада – Х», 1998. – 104 с. 12.Копылова С.В. Влияние препарата «Апингалин» на некоторые показатели эндогенной интоксикации крови крыс при отеке легких / С.В. Копылова, А.А. Пашкина, Ю.А. Старателева // Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского. – 2010. – № 2 (2). – С. 532 – 535.13.Копылова С.В. Исследование показателей системы гемостаза крови крыс при ингаляционном введении препарата «Апингалин» в условиях моделирования отека легких / С.В. Копылова, Ю.А. Старателева // Международный научно-исследовательский журнал. – 2013. – №. 1-1 (8). – С. 78 – 80.14. Крылов В.Н. Теоретическая и экспериментальная апитерапия. [Электронный ресурс]. Режим доступа:http://www.apiworld.ru/1353486823.html15. Крылов В.Н., Сокольский С.С. Применение биологически активных добавок на основе пчелопродуктов / Фундаментальные исследования. – 2006. – № 10 – С. 47 – 49.16. Омаров Ш.М. Апитерапия: продукты пчеловодства в мире медицины. Ростов-на-Дону: Феникс, 2009. 351 с.17. Омаров Ш.М. Апитерапия: продукты пчеловодства в мире медицины // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2012. № 9. С. 36.18.Определение показателей гемостаза на программируемом оптико-механическом коагулометре Минилаб 704 [Электронный ресурс]. Режим доступа: http://www.coagulometers.ru/minilab704.htm19. STATFAX® 3300 Биохимический анализатор. Руководство пользователя. AWARENESSTechnologyInc. [Электронный ресурс]. Режим доступа: http://www.awareness.ru/support/show/1184ПРИЛОЖЕНИЕТаблица 1Результаты анализа белкового обмена крысГруппа№п/пОбщий белок, г/лКреатинин, мкмоль/лМочевина, ммоль/лФибриноген, г/лАльбумин г/дл,И-группа1103175,20,02190,644,1274,7230,70,01360,140,3380,3209,90,00990,0546,7478238,80,0090,340,2585236,40,01070,1346,3К-группа174,2327,10,00531,7446,6277,3195,80,004244,3373,8183,90,00272,0643,4463,7221,80,00120,5241,3575,13200,00134,8233,5АДР-группа156,4251,60,00270,5147,2258,8218,30,00670,1340,3365,1220,50,00640,1342,8475,7398,50,004246,2567257,50,00510,1247,2682,6220,90,00620,1841,5777,6217,70,00441,4897,5174,70,00560,1140953,8216,80,00670,1242,91084,2262,40,00660,1243,9АДР-АП-группа163,9400,30,00015,8745,3271,7212,70,00320,1240,6370316,60,03320,946,8470,9349,10,00760,1249,2574,6281,10,00170,2244,9680,6339,40,00632,2847,2775,9282,40,00280,2136,9869,32390,00740,1946,1971,9215,30,00380,748,21073264,80,00710,2636,3