Фармацевтический анализ лекарственных средств на основе соединений ртути

Раствор хранят при температуре 4- 8°С в течение 3 мес.
Приготовление 0,001% раствора дитизона. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг дитизона, растворяют дитизон в хлороформе, доводят объем раствора хлороформом до метки и перемешивают. Раствор хранят в темном месте при температуре 4 – 8 °С в течение не более, чем 1 месяц.
Перед измерением 10 мл раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора хлороформом до метки и перемешивают. Раствор используют только свежеприготовленным.
Измерение оптической плотности полученного раствора проводят при длине волны 597 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм, сравнение ведут с контрольным раствором - вода очищенная. Диапазон колебаний показаний оптической плотности при измерениях не должен превышать ( 0,05 от среднего значения.
Приготовление 20 % раствора гидроксиламина сульфата. В мерном цилиндре вместимостью 500 мл в воде очищенной растворяют 100 г гидроксиламина сульфата, доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор хранят при температуре 4 – 8 °С в течение 6 мес.
Приготовление 6 М раствора уксусной кислоты. Вносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл 340 мл уксусной кислоты ледяной, доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор хранят при комнатной температуре в течение 6 мес.
Приготовление серной кислоты разведенной. В коническую колбу вместимостью 250 мл вносят 100 мл воды очищенной и осторожно при постоянном перемешивании прибавляют 100 мл серной кислоты концентрированной. Работу следует проводить в вытяжном шкафу, соблюдая технику безопасности. Раствор хранят при комнатной температуре в течение 6 мес.
Приготовление 0,1 М раствора аммония роданида (раствор А) готовят из 0,1 H стандартного фиксанала согласно инструкции по приготовлению. Раствор хранят при температуре 4 – 8 °С в течение 6 мес.
Приготовление 0,01 М раствора аммония роданида (раствор В) проводят в мерной колбе вместимостью 50 мл, куда вносят 5 мл раствора А и доводят объем водой очищенной до метки. Раствор также готовят при каждом определении.
Приготовление раствора азотной кислоты разведенной проводят в конической колбе вместимостью 250 мл на очищенной воде с добавлением 72 мл азотной кислоты концентрированной.
Раствор может храниться при комнатной температуре в течение 6 месяцев.
10 % раствор квасцов железоаммонийных получают из 90 мл воды, 10 г квасцов железоаммонийных с добавлением разведенной азотной кислоты до перехода коричневой окраски раствора в желтовато-зеленую.
Полярографический метод
Для испытаний раствор образца помещают в колбу на 50 мл с притертой пробкой, прибавляют 0,5 мл 2М раствора хлорида калия. Полученный состав помещают в электролизер, термостатируют его при температуре 19 - 21°С. Затем через испытуемый раствор пропускают газообразный азот в течение 10 - 15 мин. Ртутный капельный электрод опускают в электролизер и снимают полярограмму на полярографе с регистрирующим устройством в области потенциала внутренний анода от 0,2 до 1,0 В. В настоящее время применяют разные конструкции полярографов.
Содержание тиомерсала Х3 в мкг/мл рассчитывают по формуле:
Х3 = а * 5,0/4,5
где: а – количество тиомерсала в испытуемом растворе, найденное по калибровочному графику, мкг/мл;
5,0 – общий объем пробы, мл;
4,5 – объем испытуемого раствора, взятого на анализ, мл.
Калибровочный график для оценки строят по результатам измерения стандартного раствора тиомерсала № 2 с содержанием 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5 мл 2. К нему 2 М раствор калия хлорида, доводят общий объем водой очищенной до 5 мл, в результате получают растворы с концентрацией тиомерсала 30; 45; 60; 75; 90; 105; 120; 135 мкг/мл соответственно.
По полученным полярограммам строят калибровочный график, на оси ординат откладывают среднее значение высоты волны, а на оси абсцисс откладывают значение концентрации тиомерсала в мкг/мл. Калибровочный график пригоден неограниченное время для определенного данного капилляра при постоянных условиях определения.
Тиомерсал, используемый для приготовления стандартного раствора №1, должен соответствовать требованиям, указанным в разделе «Методы оценки качества тиомерсала».
Метод электротермической атомно-абсорбционной спектрометрии
Анализ проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации прибора – электротермического атомно-абсорбционного спектрометра.

Атомно-абсорбционный спектрометр
Испытуемый образец помещают в отверстие графитовой трубки прибора и измеряют оптическую плотность образцов при длине волны 253,7 нм в следующей последовательности. Сначала помещают контрольный раствор воды очищенной, затем проверяют калибровочные растворы, их замеряют в порядке увеличения измеряемой концентрации. После этого измеряют стандартный образец «Содержание тиомерсала в сорбированных препаратах» и испытуемый образец. Анализ испытуемых образцов в указанной последовательности проводят не менее трех раз.
Содержание тиомерсала в испытуемом образце в мкг/мл рассчитывают по калибровочному графику с помощью программного обеспечения к прибору с учетом разведения испытуемого образца.
Построение калибровочного графика этого метода проводят на образцах стандартного раствора тиомерсала № 4 с концентрацией 2 мкг/мл, содержащих 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6 мл, которые в итоге имеют концентрацию тиомерсала в растворе равной 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 1,2 мкг/м.
Калибровочный график необходимо воспроизводить при проведении каждого определения.
Метод электротермической атомно-абсорбционной спектрометрии применяют для ИЛС с содержанием тиомерсала в диапазоне от 20 до 120 мкг/мл, а также для анализа остаточного содержания тиомерсала в ИЛП.
Методы оценки качества тиомерсала - О-этилртуть тиосалицилата натрия М.м. 404,8 С9H9HgNaO2S.
Описание. Белый порошок с легким кремовым оттенком со слабым характерным запахом.
Растворимость. 1 г реактива без остатка растворяется при температуре 18-22 °С в 1 мл воды, а также в 35 мл спирта. Раствор должен быть бесцветным или светло-желтым. Препарат почти не растворим в бензоле и эфире.
Значение кислотности должно соответствовать рН 6,0-8,0. Для проверки соответствия рН используют 1% раствор на прокипяченной очищенной воды. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия».
Подлинность. Определение проводят из навески в 0,05 г, которую растворяют в 5 мл воды очищенной. К раствору прибавляют 1,0 мл 10 % раствора меди сульфата. Образуется осадок зеленого цвета.
Осадок, массой растворяют 0,5 г реактива в 10 мл воды очищенной и прибавляют 1 мл 2М раствора соляной кислоты. При этом образуется осадок, затем выделившийся осадок отфильтровывают на воронке Бюхнера, а затем его промывают водой дистиллированной до исчезновения хлорид ионов в воде. Осадок, высушенный до постоянной массы при комнатной температуре в присутствии оксида фосфора (V) при давлении не более 0,667 кПа (5,0 мм рт.ст.), имеет температуру плавления 110°С.
Ртутные соли. Для проверки растворяют 0,1 г реактива в 5 мл воды очищенной. К раствору прибавляют 1 мл 5% свежеприготовленного раствора натрия сульфида. Выпавший осадок не должен изменять цвета при выдерживании в темном месте в течение 30 мин.
Растворимые в эфире вещества. Для проверки отвешивают 0,5 г реактива с точной навеской и встряхивают с 20 мл эфира в течение 10 мин, затем проводят фильтрацию через плотный фильтр. После испарения эфира остаток, высушивают в течение 22 - 24 ч в присутствии оксида фосфора (V) при давлении не более 0,667 кПа (5,0 мм рт.ст.) и комнатной температуре, должен весить не более 4 мг.
Потерю в массе при высушивании проводят до постоянной массы из навески 0,5 г реактива в течение 24 часов в присутствии фосфора (V) оксида. Потеря в массе при высушивании не должна превышать 0,5%. Определение проводят в соответствии ОФС «Потеря в массе при высушивании».
Количественное определение проводят из навески в 0,3 г, куда добавляют 10 мл воды. Туда прибавляют 1,5 г растертого калия перманганата КМnО4 и хорошо перемешивают. Через 5 мин в колбу прибавляют 5 мл концентрированной серной кислоты, а образующийся через 5 - 10 минут осадок, растворяют прибавляя 4 - 8 мл 3 % раствора водорода пероксида.
К обесцвеченному раствору прибавляют также по каплям 5 % раствор КМnО4 до исчезновения розового окрашивания. Раствор обесцвечивают снова 4 % раствором щавелевой кислоты, затем прибавляют 5 мл 10 % раствора железоаммонийных квасцов и титруют раствор 0,1 М раствором аммония роданида до изменения окраски. При расчете принимают, что 1 мл 0,1 М раствора аммония роданида соответствует 0,02024 г тиомерсала.
Тиомерсал должен быть высушен в присутствии фосфора (V) оксида реактив должен содержать не менее 98 % и не более 101% тиомерсала.
Хранение. Поскольку это ЯД, для его хранения используют банки с притертой пробкой, и хранят в сейфе, защищенном от света.
Реактив подвергают контролю 1 раз в 3 мес.Если тиомерсал не соответствует одному из перечисленных требований, его бракуют.
При разработке методик контроля качества ртутьсодержащих веществ проведена была отработка методик, которая включает определение рабочего диапазон метода, выбрана схема определения линейности зависимости, выбраны и оптимизированы условия подготовки проб исследуемых образцов. Кроме этого проведено сравнительное определение веществ разными методами и выявлено статистически значимых различий в результатах, полученных при использовании разных методов
Заключение

Таким образом, ртутьсодержащие лекарственные средства, несмотря на опасность ртути, и соединений на её основе, как лекарственных препаратов, применяют достаточно широко. Применение ртути в производстве лекарственных средств обусловлено спецификой физико-химических свойств ртути и её химических соединений, обеспечивающих фармакологическое действие ртутьсодержащих средств. В основном ртутьсодержащие средства используют в качестве антисептических, дезинфицирующих и противопаразитарных средств. Особенно важны ртутьсодержащие средства при производстве и хранении вакцин. Именно это послужило базой для разработки уточненных требований по валидации ртутьсодержащих средств.
В Государственной фармакопее XIII, которая вводится с 2018 года есть новая общая фармакопейная статья ОФС.1.2.2.2.0005.15 Ртуть. Кроме того взамен ФС 42-3874-99 "Количественное определение тиомерсала в иммунобиологических лекарственных препаратах вводится ОФС.1.7.2.0025.15.
 Государственная Фармакопея Российской Федерации XIII издания введена в действие с 1 января 2016 года приказом Минздрава России № 771 от 29 октября 2015.
В связи высокой токсичностью ртути в последнее время были проведены дополнительные исследования по разработке точных методов количественного определения содержания ртути в лекарственных средствах и были разработаны для этой цели новое высокоточное измерительное лабораторное оборудование. При разработке Фармакопеи XIII проведены исследования по отработке методик, определены рабочие диапазоны методов, выбраны диапазоны линейности на зависимостях состав-свойство, а также выбраны и оптимизированы условия подготовки проб исследуемых образцов.

Использованная литература

1. Мелентьева Г.А., Антонова Л.А. Фармацевтическая химия. - М. Медицина, 1985. - 482с.
2. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. 4-е изд.- МЕДпресс-Информ, 2007. - 624 с.
3. Спирова С.Н. Автореферат "Исследование содержания примесных элементов (кадмий, свинец, ртуть) в лекарственных средствах и сырье природного происхождения. М. - 1995. 27 с.
4. Вредные вещества в промышленности, под ред. Н. В. Лазарева и И. Д. Гадаскиной, т. 3 - JI.:- 1976.-с. 384.
5. Угай Я.А. Общая и неорганическая химия. – Изд.5. — М.: «Высшая школа». – 2004. – 527 с.
6. Коттон Ф. А. и Уилкинсон Дж. Основы неорганической химии. М.: - 1979. - с. 454.
7. Химическая энциклопедия Кнунянц И.Л. и др.. -М.: Советская энциклопедия, 1992. - Т. 3. - 639 с.
8. Машковский М. Д. Лекарственные средства, ч. 2, с. 349, М., 1977
9. Контроль качества лекарственных препаратов. - Казань: Изд-во Казанского гос. технол. ун-та, 2002. - 44 с.
10. XIII Государственная фармакопея Российской Федерации
11. Колесникова О.Н., Устинова О.Б., Рукова О.Б., Бондарев В.П. Определение метриолята в несорбированных ИЛП методом ААС по ионам ртути. Отработка методики и оценка статистической значимости различий результатов определения ионов ртути колориметрическим методом и методами АСС.
12. Волкова Р. А. Система контроля качества медицинских иммунобиологических препаратов химическими и иммунохимическими методами. Автореферат дис. - МНИЭМ им. Габричевского.- 2009.- 25 с.



XIII Государственная Фармакопея Российской Федерации

ОФС.1.2.2.2.0005.15 "Ртуть"
Mercury in the environment, ed. by L. Friberg a. J. Vostal, Cleveland, 1972
Recommended health — based limits in occupational exposure to heavy metals, Techn. Rep. ser. № 647, p. 102, Geneva, WHO, 1980
Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. — 4-е изд., перераб., и доп. — МЕДпресс-Информ, 2007. — 624 с
Угай Я.А. Общая неорганическая химия. М.: Высшая шк. -2004,-527 с.; Химическая энциклопедия / Редкол.: Кнунянц И.Л. и др.. — М.: Советская энциклопедия, 1992. — Т. 3. — 639 с .; Коттон Ф. А. и Уилкинсон Дж. Основы неорганической химии, пер. с англ., с. 454, М., 1979

http://greenologia.ru/othody/metally/rtut
http://greenologia.ru/othody/metally/rtut
Астахова А.В., Лепахин В.К. Лекарства. Неблагоприятные побочные реакции и контроль безопасности — 2-е изд., испр. и доп.: — М.: Эксмо, 2008. — 256 с.; Трахтенберг И. М. Хроническое воздействие ртути на организм, Киев, 1969
Машковский М. Д. Лекарственные средства, ч. 2, с. 349, М., 1977
Приказ N 82 Об исключении из государственного реестра лекарственных средств препаратов ртути и её соединений. 23 марта 1998 г.

ОФС.1.2.2.2.0005.15 "Ртуть"
ОФС.1.7.2.2.0025.15 "Тиомерсал"

ОФС.1.2.2.2.0005.15 "Ртуть"
XIII Государственная фармакопея Российской Федерации












30