Метод радиоавтографии. Применение в гистологии

Перед нанесением эмульсии для световой микроскопии препарат обычно окрашивают требуемой гистологической окраской, но более бледно, чем обычно, чтобы сделать возможным подсчет зерен серебра на всех участках [6].Препараты хранят в светонепроницаемых коробках.После определенного периода экспозиции их проявляют фотографическим способом и изучают. Когда радиоактивные частицы попадают в кристаллы бромистого серебра, содержащиеся в фотоэмульсии, они превращаются в мелкие черные зерна металлического серебра, тем самым обнаруживая присутствие радиоактивного соединения в ткани.Обнаружение радиоактивных соединений в определенных тканевых компонентах позволяет получить обширную информацию. Например, при использовании радиоактивных аминокислот можно установить, какие клетки в данной ткани вырабатывают больше белка, а какие - меньше, поскольку количество зерен серебра, образовавшихся над клетками, пропорционально интенсивности синтеза белка [1].Для того, чтобы установить, где в органе образуются новые клетки и куда они мигрируют, вводится радиоактивный тимидин и получают материал спустя различное время после инъекции. Радиоавтографы срезов покажут, где клетки делятся и в случае их миграции куда они мигрируют.Примеры радиоавтографов приведены на рис. 1– 3 [1].Рис. 1. Радиоавтографы срезов ткани мыши, которой за 1 ч до получения органов ввели 3Н-тимидин. Малое увеличениеТак как радиоавтографы экспонировали в течение очень продолжительного времени, радиоактивные ядра содержат большое количество метки и покрыты «облаками» темных зерен. На рис. 1А в основании кишечных желез (треугольники) многие клетки делятся, но вдоль ворсинок (стрелка) делящиеся клетки отсутствуют. На рис. 1 Б на срезе лимфатического узла видно, что деление клеток происходит преимущественно в его герминативных центрах (стрелка).Рис. 2. Радиоавтографы поднижнечелюстной железы мыши после введения3 I-фукозы за 8 ч до получения материала. Большое увеличениеНа рис. 2 А при использовании светового микроскопа можно видеть черные зерна серебра, указывающие на участки клетки, содержащие радиоактивные вещества. Большая часть радиоактивного материала находится в гранулах клеток гранулярных протоков железы.На рис. 2 Б представлена та же ткань, подготовленная методом электронно-микроскопической авторадиографии. Зерна серебра при этом увеличении выглядят как извитые структуры, расположенные главным образом над гранулами (Г) и в просвете железы (П).Рис. 3. Распределение аминокислоты лейцина в клетках поджелудочной железы с течением времениЗаключениеМетод радиоавтографии основан на выявлении локализации в тканях веществ,введенных в них и меченных радиоактивными изотопами. Меченое вещество вводится непосредственно в организм или в инкубационную среду, в которую помещают удаленный кусочек.Радиоавтография позволяет проследить ход включения меченого предшественника в макромолекулы и транспорт последних в клетках и тканях. Этим методом получены основополагающие данные о процессах синтеза и секреции различных веществ, локализации рецепторов, делении клеток и кинетике клеточных популяций.Анализ материалов говорит о том, что это направление научного исследования быстро развивается, причем возникают все новые задачи, связанные с совершенствованием существующих и созданием оригинальных методических приемов.Опубликованы работы, углубляющие современные представления о механизме действия ионизирующего излучения на эмульсию и природе ее чувствительности. Разработан прямой метод определения чувствительности микрокристаллов к заряженным частицам.Значительное внимание в последнее время уделяется повышению чувствительности эмульсий.Для улучшения качества радиоавтографовсегодня используются ядерные эмульсии, разбавленные желатином.Таким образом, в гистологии метод радиоавтографии получил широкое применение, исходя из его возможностей.Он позволяет проводить исследования биологических явлений на срезах тканей с использованием радиоактивности и обнаружить радиоактивные вещества в тканях благодаря воздействию радиоактивного излучения на фотоэмульсию.Список использованной литературыАфанасьев, Ю. И. Гистология, эмбриология, цитология : учебник / Ю. И. Афанасьев, Н. А. Юрина, Е. Ф. Котовский и др. ; под ред. Ю. И. Афанасьева, Н. А. Юриной. - 6-е изд. ,перераб. и доп. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2016. - 800 с.Бойд Д.А. Авторадиография в биологии и медицине / пер. с англ. И.А. Кедер-Степановой и А.В. Миллера ; под ред. и с предисл. проф. А.М. Кузина и Я.В. Мамуля. – М. : Изд-во иностр. лит., 1989. - 357 с.Быков В.Л. Цитология и общая гистология : учебник для студентов медицинских институтов. – СПб. : СОТИС, 2002. – 255 с.Епифанова О.И. Радиоавтография : учебное пособие для биологических специальностей вузов / О.И. Епифанова, В.В. Терских, А.Ф. Захаров. – М. : Высшая школа, 1977. - 246 с.Зиматкин С.М., Мацюк Я.Р., Можейко Л.А., Михальчук Е.Ч., Барабан О.В. Гистология, цитология, эмбриология : учебник для студентов высшего образования по специальности «Медико-диагностическое дело» / Под ред. С.М. Зиматкина. – Минск :Вышэйшая школа, 2022. – 446 с.Роджерс Э. Авторадиография / Перев. с англ. О.Μ. Зараевой, А.В. Ткачевой, Г.П. Краснощековой, В.Е. Зайчика ; под редакцией и с предисловием проф. А.В. быховского. – М. :Атомиздат, 1972. -304 с.Саркисов Д.С. Перов Ю.Л. Микроскопическая техника. - М. : «Медицина», 1996. – 544 с.